特别激动和兴奋的想法，反而，这个技术技能提升后啊，让方子业的心情和思维，变得稍微平静了很多。

方子业也不知道为什么！

明明啊，几分钟之前，自己都很想把这个课题完成，然后看看那位师伯的嘴脸的，结果实验技术加点上来后，这种心情反而是没有那么足了。

方子业猜测啊，可能，比起让那位师伯在师父面前无能为力，自己的能力提升，实力的差异化，使得方子业，更有一种成就感。

比起看某些人的嘴脸，方子业更希望做的事情是，真正地体会实验成果的快乐。

签字笔写过的笔记，墨迹已干——

实验设计和计划：

确定研究的科学目标和问题。制定实验计划，包括动物模型的选择、基因敲除的方法等。

动物模型的选择：

选择适当的实验动物，一般是小鼠或大鼠，取决于研究问题和模型的可行性。

这两点是完全摘抄了基础理论部分，属于是课题实验的总纲，没什么特别的意义。

更重要的是下面。

确定hk2基因敲除的具体方法！

常见的包括crispr/cas9技术、基因敲除小鼠的胚胎干细胞等。

只一句话，难度一下子就上来了。

crispr/cas9技术，是一种基因编辑技术，编辑基因，就需要依靠这种技术，但是如何敲除，而且要在敲除后，得到基因小鼠的胚胎干细胞，一下子就变得迷离起来。

试验动物在进行了动物试验后，无法再繁殖，但不代表，实验动物模型从一开始，就是完成体。

这需要在小鼠受精后的胚胎干细胞阶段，就得将它们取出，进行基因编辑。

然后的操作步骤是：

设计基因编辑工具、基因编辑体外实验：

在体外对胚胎干细胞或其他适当的细胞进行基因编辑，验证编辑工具的有效性。

基因编辑体内实验：

将编辑过的胚胎干细胞或基因编辑工具引导到动物体内，通常是小鼠或大鼠的胚胎。

筛选正常的基因编辑体：

通过分子生物学技术，如pcr、southern blotting等，筛选出成功敲除hk2基因的动物。

动物繁殖：

利用成功编辑的胚胎培育出整个基因敲除的动物，通常是通过繁殖和筛选产生基因敲除体的后代。

验证基因敲除效果：

对产生的基因敲除体进行详细的分子生物学和生化学分析，确认hk2基

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